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      供應有機磷農(nóng)藥酶聯(lián)免疫試劑盒
      • 行業(yè)分類:
        其他 > 生物工程
      • 產(chǎn)地:
        浙江
      • 銷售區(qū)域:
        全國
      • 所屬品牌:
      • 更新時間:
        2018/9/20 10:41:00
      • 信息有效期:
        2019/9/14
      聯(lián)系方式(個人)
      • 聯(lián)系人:
         

      使用目的:

      本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)殘留的定量檢測。

      實驗原理

      本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides偶聯(lián)抗原,加入有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides標準品或樣品,游離有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides與微孔條上預包被的有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides偶聯(lián)抗原互相競爭抗有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides含量成反比,通過標準曲線計算樣品中有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides的含量。 

      試劑盒組成 

      3.1 預包被的有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides偶聯(lián)抗原的可拆酶標板:1塊(12×8條)。
      3.2
      有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ug/ml, 0.4 ug/ml,1.2 ug/ml,3.6 ug/ml,10.8 ug/ml,32.4ug/ml

      3.3環(huán)丙沙星(CIP抗體酶結合物:1瓶(6ml)。
      3.4
      顯色液A1瓶(6ml)。
      3.5
      顯色液B1瓶(6ml)。
      3.6
      終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
      3.7
      樣本稀釋液:1瓶(10×,  6ml),用于樣品稀釋用。
      3.8
      濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
      3.9
      說明書一份。

      需要而未提供的材料
      4.1 
      設備
      4.1.1
      波長450nm酶標儀。 
      4.1.2
      粉碎機。
      4.1.3
      量筒。
      4.1.4
      振蕩器。
      4.1.5
      漏斗。
      4.1.6Whatman No 1
      或相當?shù)臑V紙。
      4.1.7
      微量移液器。
      4.2 
      試劑
      4.2.1
      去離子水或蒸餾水。
      4.2.2 
      甲醇。
      貯存
      5.1 
      試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍
      5.2 
      未用完的微孔板應該密封干燥保存
      注意事項
      6.1 
      使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
      6.2 
      不要使用過期試劑盒。
      6.3 
      試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
      6.4 
      標準品中含有有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides),使用時應特別注意,操作時應帶手套。
      6.5 
      終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
      6.6 
      不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結果。
      6.7 
      不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結果。
      6.8 
      稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結果
      6.9 
      混合試劑時應避免起泡。
      工作液準備
      7.1
      有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides標準品溶液:0ug/ml, 0.4 ug/ml,1.2 ug/ml,3.6 ug/ml,10.8 ug/ml,32.4ug/ml

      7.2 濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用

      7.3 樣本稀釋液:備用
      7.3 
      顯色劑:已備用,避免光線直照
      7.4 
      反應終止液:已備用
      樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現(xiàn)結果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
      8.110g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
      8.2強力振蕩3分鐘
      8.3Whatman No 1濾紙過濾
      8.4100µl處理后的樣品,加入400µl樣本稀釋液
      8.550μl稀釋液進行分析(稀釋倍數(shù)10
      酶免分析步驟
      9.1 
      實驗須知
      9.1.1 
      實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時間約2小時。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
      注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的*度和準確度。
      9.1.2 
      使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
      9.1.3 
      請不要改變分析程序
      9.1.4 
      請使用*的微量移液器
      9.1.5 
      操作一旦開始,請不要中斷任何程序
      9.1.6 ELISA
      結果的可重復性極大程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
      9.1.7 
      為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
      9.1.8 
      加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
      9.2 
      分析步驟
      9.2.1 
      預先進行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,推薦進行雙孔檢測
      9.2.2 
      取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
      9.2.3 
      樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
      9.2.4 
      B0孔中加入50µl0.0 ng/ml標準品溶液
      9.2.5 
      在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
      9.2.6 
      在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
      9.2.7 
      在所有孔中加入50µl的抗有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)抗體酶結合物
      9.2.8 
      輕輕晃動反應板幾秒鐘。 
      9.3 37
      ℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)
      9.3.1 
      甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,*后*應在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。
      9.4 
      反應
      9.4.1 
      洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應板使之徹底混勻
      9.4.2 37
      ℃溫浴10min
      9.4.3 
      每孔中加入50µl終止液,混勻
      9.4.4 
      450nm下檢測吸光度,結果在5min內(nèi)讀取。
      10 
      結果計算
      10.1
      定量分析
      10.1.1
      所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標準(0標準)的吸光度值(B0)再乘以*,即百分吸光度值。
      B—
      標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
      B0—0 ug/ml
      標準溶液的平均吸光度值
      10.1.2
      以有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標準曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應點的橫坐標,即為有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)濃度的對數(shù)值,求得反對數(shù)即為測定液中有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides)濃度Cug/ml
      10.1.3
      由于樣品經(jīng)過了預先稀釋,因此根據(jù)標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。 
      10.2 
      半定量測定
      10.1.1
      目測半定量測定:首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行,根據(jù)樣品與標準品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。
      10.1.2
      儀器半定量測定:首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行,根據(jù)樣品與標準品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。

      11 特異性
      物質 交叉反應
      有機磷農(nóng)藥(Organophosphorus Pestcides*

      12 試劑盒參數(shù)
      本試劑盒檢測下限為0.4 ug/ml
      B0
      吸光度*值應大于1.0
      試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8%,板間誤差小于15%。
      用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。
      13 
      標準曲線模式(僅供參考)
      試劑盒提供的標準曲線范圍為0.4ug/ml ~32.4ug/ml。 

      14 分析限制
      本試劑盒檢測為陽性的樣品應該用另一種方法如HPLCGC/MS加以確證

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